Publicación:

Código de barras de adn aplicado a la identificación de restos de ingestas sanguíneas en especies del género lutzomyia (diptera: psychodidae) en un microfoco periurbano de leishmaniasis cutánea de Sincelejo, Sucre.

Resumen en español

Los vertebrados cumplen un papel importante en la epidemiología de la leishmaniasis en Sincelejo, donde actualmente existe un microfoco urbano de leishmaniasis cutánea, pero como en otras regiones de Colombia, se desconocen las complejas relaciones insecto-vertebrado. Los registros sobre fuentes de ingesta se limitan a observaciones de captura de insectos sobre los animales, e identificación directa o indirecta de especies de vertebrados por técnicas inmunológicas y técnicas de biología molecular. Aunque la utilidad de éstas últimas ha sido probada en diferentes insectos vectores, se ha planteado que el éxito cuando se usan genes nucleares depende del grado de digestión de la sangre. Sin embargo, tales aspectos son desconocidos para genes mitocondriales, lo que motivó nuestro interés en conocer el tiempo efectivo de detección del gen citocromo b y además emplear esta técnica en este trabajo para identificar cuáles son las especies que sirven como fuente de ingesta a los flebotomíneos asociados a la transmisión de Leishmania spp., en la ciudad de Sincelejo. Para esto se recolectaron 100 hembras del género Lutzomyia (Lu.) con una trampa de luz tipo Shannon. Los insectos capturados con la trampa Shannon e identificados como Lu. evansi fueron mantenidos en jaulas de cría donde se les ofreció sangre humana desfibrinada y descomplementada, en total se alimentaron 80 hembras. Durante ocho días consecutivos se sacrificó diariamente un número de hembras, a cada una se le extrajo el DNA, se amplificó un fragmento de 358 pb del gen mitocondrial citocromo b y se analizaron los productos por electroforesis en gel de agarosa. Se encontró que hasta los siete días pos-ingesta se detecta la banda esperada, sin embargo, la intensidad de la banda decrece a partir del día dos debido probablemente a que el insecto concentra las células sanguíneas, y aunque no se observaron diferencias en la cantidad del DNA, los extractos contenían altos niveles de proteínas que pueden inhibir la reacción. Luego se instalaron 4 trampas de luz tipo CDC y se capturaron 158 insectos, agrupados en 4 especies, entre estos el .presentó restos de ingesta sanguínea y a partir de ellos se amplificó un fragmento de 358 pb del gen mitocondrial citocromo b. Posteriormente, se secuenciaron 58 amplicones y se obtuvieron 37 secuencias de cinco especies de vertebrados: Bos Taurus (22/37), Equus caballus (1/37), Cairina moschata (1/37), Tamandua spp. (1/37), y Homo s. sapiens (12/37) en Lu. evansi, y Homo s. sapiens en Lu. panamensis. Estos resultados permiten concluir que Lu. Evansi 13 es un flebotomíneo con comportamiento antropofílico, aunque, en este estudio se encontró alimentada en alta frecuencia de Bos taurus, y puede alimentarse tanto de animales doméstico como silvestres.